2.液体培养基(加血清)存放期为六个月,期间glutamine可能会分解,若细胞生长不佳可以再添加适量glutamine。3.粉末培养基配制(以1升为例):3.1.细胞培养基通常须添加10%血清,因此粉末培养基之配制体积为900ml,pH为7.2-7.4。NaHCO3为另外添加,若将NaHCO3粉末直接加入液体培养基中会造成pH之误差,或局部过碱。因此粉末培养基及NaHCO3粉末应分别溶解后才混合,然后用CO2气体调整pH,而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH),因为氯离子对细胞生长可能有影响,且贮存时培养基的pH易发生改变。生物3.2.材料:纯水(milli-Q水或二次至三次蒸馏水,水品质非常重要),粉末培养基,NaHCO3电磁搅拌器,无菌血清瓶,0.1或0.2mm无菌过滤膜,pH计,真空泵,CO2气体。3.3.步骤:3.3.1.取粉末培养基溶于700mlmilli-Q水中,搅拌使其溶解。3.3.2.称取适量之NaHCO3粉末溶于200mlmilli-Q水中,搅拌使其溶解,然后通入CO2气体至饱和,约3-5分钟。3.3.3.将溶解且含饱和CO2之NaHCO3溶液加入溶解之液体培养基中混合。混后溶液之pH应为7.2-7.4,除非pH值偏差太大,否则不需用酸碱再调整之。若为太碱,可再通入CO2气体调整pH。培养基以真空帮浦通过过滤膜时,pH会升高0.1-0.2。3.3.4.以0.1或0.2mm无菌过滤膜过滤灭菌,同时分装至无菌容器中,标示培养基种类、日期、瓶号等,贮存于4℃。(血清亦可加入培养基中一起过滤)3.3.5.配制之培养基配制须作生长试验与污染测试。