货号

R009

种属

大鼠

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

疏松贴壁，有漂浮的细胞簇 上皮样

培养条件

培养基：F-12K+2.5%FBS　(推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-500）+15%HS(推荐HAKATA马血清，货号:HM-FBS-500)

温度：37℃     气相：95%空气，5%二氧化碳

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将培养基吸出，1000r/min离心5min去上清，再往其中加入5-6mL新鲜培养基，吹打均匀后，转移至原培养瓶并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2天换一次液；

2.待细胞长满瓶底面积70-80%，需要对其进行传代，传代比例为1:2-1：4；

3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃预热，吸出培养基至离心管，往培养瓶中加入1-2 ml PBS，轻晃洗涤将PBS转移至离心管。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于室温孵育消化（第一次消化需置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液至离心管，1000rpm离心5min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。

保存

冻存条件：70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO

(备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。)

保存条件：液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以哈哈体育会及时安排帮老师解决。

2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基。

3.注意该细胞为轻微贴壁，且有较多细胞悬浮，需要通过离心的方式收集悬浮细胞再传代换液。